CD209f Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-427311

Panoramica

Cd209f codifica CD209f, un recettore lectinico di tipo C espresso prevalentemente nelle cellule mieloidi presentanti l’antigene, dove media il riconoscimento di ligandi glicosilati e supporta l’endocitosi guidata dal recettore. Coordinando il riconoscimento dei patogeni, la loro captazione e il traffico intracellulare, CD209f contribuisce al processamento dell’antigene e alla successiva regolazione delle risposte immunitarie innate e adattative, inclusi i programmi di citochine infiammatorie. I legami funzionali con l’attivazione di cellule dendritiche e macrofagi rendono Cd209f rilevante per gli studi sulle interazioni ospite–patogeno, sull’immunità di barriera e sui meccanismi di tolleranza immunitaria.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO CD209f (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Cd209f in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Cd209f insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Cd209f a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina CD209f.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Cd209f per lo studio della segnalazione di CD209f, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Cd209f critici per la funzione di CD209f
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Cd209f per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal CD209f CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal CD209f CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Cd209f. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal CD209f Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR CD209f (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Cd209f per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Cd209f definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.