CD2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419537
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CD2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CD2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CD2 Anticuerpo (RM2-5): sc-19639
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CD2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419537 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen murino **Cd2** codifica **CD2**, un receptor de adhesión y señalización de la superfamilia de las inmunoglobulinas, expresado predominantemente en células T y células NK, que media el contacto célula–célula mediante su interacción con ligandos como **CD58/CD48**. CD2 participa en la formación de la sinapsis inmunológica y en la señalización coestimuladora que determina los umbrales de activación de las células T, la remodelación del citoesqueleto y vías posteriores, incluidas las de las quinasas de la familia Src, **MAPK** y **NF-κB**. Al influir en la adhesión, migración y diferenciación efectora de los linfocitos, CD2 contribuye a la regulación de las respuestas inmunitarias adaptativas y a la homeostasis inmunitaria. La señalización y adhesión dependientes de CD2, cuando están desreguladas, se han implicado en fenotipos inmunitarios asociados a inflamación y autoinmunidad, lo que respalda su uso en estudios mecanísticos de la función de las células T.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CD2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Cd2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Cd2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Cd2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CD2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Cd2 para la investigación de la señalización de CD2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Cd2 críticos para la función de CD2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Cd2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CD2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido CD2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Cd2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CD2 (m) y el plásmido HDR CD2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Cd2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Cd2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.