CD2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419537

概要

マウスCd2は、免疫グロブリンスーパーファミリーに属する接着・シグナル伝達受容体であるCD2をコードしており、主としてT細胞およびNK細胞に発現しています。CD2は、CD58/CD48などのリガンドとの相互作用を介して細胞間接触を仲介します。CD2は免疫シナプスの形成や共刺激シグナル伝達に関与し、T細胞活性化の閾値、細胞骨格の再構築、さらにSrcファミリーキナーゼ、MAPK、NF-κBシグナルなどの下流経路に影響を与えます。リンパ球の接着、遊走、エフェクター分化を調節することで、CD2は獲得免疫応答と免疫恒常性の制御に寄与します。CD2依存的なシグナル伝達および接着の破綻は、炎症性・自己免疫関連の免疫表現型に関与することが示唆されており、T細胞機能の機序解析研究における標的として有用です。

CD2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCd2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Cd2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Cd2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CD2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CD2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Cd2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CD2の機能に不可欠なCd2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Cd2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CD2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCD2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Cd2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CD2 HDRプラスミド（m）および CD2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCd2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCd2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。