CD151 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401969

概要

CD151（テトラスパニン-24）は、4回膜貫通型のテトラスパニンであり、テトラスパニン富化マイクロドメインを形成して、細胞膜上で接着およびシグナル伝達複合体の足場として機能します。ITGA3/ITGB1やITGA6/ITGB4といったラミニン結合性インテグリンと相互作用することで、CD151は細胞—マトリックス接着、細胞伸展、細胞運動性を制御し、さらにフォーカルアドヒージョンや細胞骨格リモデリング経路を介した下流シグナル伝達を調節します。CD151は膜輸送やエクソソーム生物学にも影響を与え、受容体の分布やシグナル伝播の様式を形作ります。CD151の発現や機能の破綻は、上皮の恒常性の変化やがんにおける浸潤性表現型、さらには腎臓および血管の病態生理との関連が報告されており、機序解明研究における有用な標的となっています。

CD151 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCD151遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CD151内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CD151のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CD151タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CD151シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CD151欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CD151の機能に不可欠なCD151エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CD151ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CD151 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCD151 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CD151遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CD151 HDRプラスミド（h）および CD151 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCD151ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCD151標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。