CCP2 Lentiviral Activation Particles (h): sc-410133-LAC

ヒトAGBL2はCCP2をコードしており、CCP2は細胞質に存在する金属メタロカルボキシペプチダーゼで、チューブリンを含むポリグルタミル化タンパク質の脱グルタミル化を触媒します。これにより微小管ダイナミクス、ならびにそれに関連する細胞内輸送や有糸分裂過程が調整されます。CCP2は、チューブリンチロシンリガーゼ様酵素によって付加されるグルタミル化マークを除去することで、繊毛関連機能、細胞骨格リモデリング、そしてモータータンパク質相互作用の正確性の制御に寄与します。チューブリンの翻訳後修飾の恒常性が破綻すると、細胞移動の変化、染色体不安定性、複数の疾患状況で観察されるシグナル伝達の変化と関連することが示されており、がん生物学や神経発生経路におけるAGBL2/CCP2の研究を支持します。これらの特性から、AGBL2は微小管関連経路、繊毛シグナル伝達、翻訳後修飾ネットワークを検討するうえで有用な結節点となります。

CCP2 レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なAGBL2の発現上昇を可能にします。

CCP2 レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、AGBL2転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性CCP2の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のAGBL2ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。