CCDC57 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-427913

概要

Ccdc57 は、コイルドコイルドメインを含むタンパク質 CCDC57 をコードしており、微小管依存的なプロセスの編成に関与すると予測される、細胞骨格およびオルガネラ関連因子です。コイルドコイルタンパク質はしばしば、中心体の完全性、細胞内輸送、細胞周期の進行を支える足場として機能するため、CCDC57 は有糸分裂紡錘体の動態やシグナル伝達の空間的制御を司る経路と関連づけられます。マウス系の研究では、これらのネットワークに属するタンパク質の攪乱が、増殖、ゲノム安定性、細胞分化に与える影響を調べることが一般的です。そのため CCDC57 は、発生表現型や、細胞骨格の構築および有糸分裂制御の破綻に関連する疾患性欠陥と交差する機序研究領域において重要な標的となります。

CCDC57 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCcdc57遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Ccdc57内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Ccdc57のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CCDC57タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CCDC57シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Ccdc57欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CCDC57の機能に不可欠なCcdc57エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Ccdc57ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CCDC57 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCCDC57 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Ccdc57遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CCDC57 HDRプラスミド（m）および CCDC57 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCcdc57ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCcdc57標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。