caveolin-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419481

概要

マウス Cav3 は、筋肉で高発現するカベオラの足場タンパク質であるカベオリン3をコードしており、膜マイクロドメインを組織化し、筋細胞膜（サルコレマ）でのシグナル伝達を統合・調整します。カベオリン3は、機械刺激のシグナル変換（メカノトランスダクション）、小胞輸送、イオンチャネルの局在化などの過程を調節し、横紋筋における PI3K–AKT シグナル伝達や一酸化窒素（NO）制御といった経路にも影響します。CAV3 機能の変化は、骨格筋および心筋における膜安定性やシグナル恒常性の破綻と関連しており、ミオパチーや心筋症モデルにおける重要性を裏付けています。そのため Cav3 は、筋生理のカベオラ依存的制御、膜修復、シグナルの区画化を研究するために広く用いられています。

caveolin-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCav3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Cav3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Cav3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、caveolin-3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、caveolin-3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Cav3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• caveolin-3の機能に不可欠なCav3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Cav3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• caveolin-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびcaveolin-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Cav3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  caveolin-3 HDRプラスミド（m）および caveolin-3 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCav3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCav3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。