caveolin-3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419481

개요

마우스 Cav3는 근육에 풍부하게 발현되는 카베올라(caveolae)의 스캐폴딩 단백질인 카베올린-3(caveolin-3)를 암호화하며, 세포막 미세구조(마이크로도메인)를 조직하고 근형질막(sarcolemma)에서의 신호전달을 조율합니다. 카베올린-3는 기계적 신호전달(mechanotransduction), 소포 수송(vesicular trafficking), 이온 채널의 위치 조절 등 다양한 과정을 조절하며, 횡문근에서 PI3K–AKT 신호전달 및 일산화질소(nitric oxide) 조절과 같은 경로에 영향을 줍니다. CAV3 기능의 변화는 골격근과 심장근에서 막 안정성과 신호 항상성의 교란과 연관되어 있어, 근병증 및 심근병증 모델에서의 관련성을 뒷받침합니다. 따라서 Cav3는 근육 생리, 막 복구, 신호 구획화에 대한 카베올라 의존적 조절을 연구하는 데 널리 사용됩니다.

caveolin-3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Cav3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Cav3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Cav3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 caveolin-3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 caveolin-3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Cav3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• caveolin-3 기능에 중요한 Cav3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Cav3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• caveolin-3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 caveolin-3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Cav3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  caveolin-3 HDR 플라스미드 (m) 및 caveolin-3 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Cav3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Cav3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.