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cathepsin Z双切口酶质粒(h) | sc-403244-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
cathepsin Z双切口酶质粒(h2) | sc-403244-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CTSZ 编码组织蛋白酶 Z(cathepsin Z),这是一种溶酶体半胱氨酸蛋白酶,参与细胞内蛋白质周转以及内体–溶酶体系统中的肽段加工。除蛋白水解作用外,组织蛋白酶 Z 还可通过调控黏附、迁移及与抗原加工相关的通路,影响细胞–基质相互作用和免疫细胞功能。在炎症与肿瘤生物学等背景下,已有研究报道 CTSZ 的表达或活性发生改变;在这些过程中,溶酶体重塑与细胞外基质动力学共同塑造细胞行为。因此,CTSZ 常被用于研究将蛋白酶依赖性信号与免疫调控及微环境重塑相联系的机制。
cathepsin Z 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CTSZ 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CTSZ内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CTSZ的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CTSZ基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。