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cathepsin K双切口酶质粒(h) | sc-400673-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
cathepsin K双切口酶质粒(h2) | sc-400673-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CTSK 编码组织蛋白酶 K(cathepsin K),这是一种溶酶体半胱氨酸蛋白酶,具有很强的胶原降解与弹性蛋白降解活性,可在破骨细胞介导的骨吸收过程中支持细胞外基质的周转。它参与内体-溶酶体系统的蛋白水解,以及与破骨细胞分化相关的重塑程序,并与 RANK/RANKL 驱动等信号网络相联系。CTSK 活性改变与骨骼及结缔组织相关表型有关;在肿瘤相关基质和炎症微环境中也有其表达失调的报道,在这些环境里基质降解会促进组织重塑。因此,CTSK 被广泛用作研究破骨细胞生物学、基质动态以及蛋白酶调控信号传导的功能性标志物与机制节点。
cathepsin K 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CTSK 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CTSK内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CTSK的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CTSK基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。