Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
cathepsin B Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419873-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- cathepsin BO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase cathepsin B (m) e o Plasmídeo Double Nickase cathepsin B (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Ctsb. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:cathepsin B Anticorpo (H-5): sc-365558
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
cathepsin B Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419873-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
cathepsin B Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-419873-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene **Ctsb** do camundongo codifica a **catepsina B**, uma protease cisteína lisossomal que medeia a renovação intracelular de proteínas e contribui para a proteólise no eixo endossomo–lisossomo, para a autofagia e para o processamento de antígenos. Para além dos lisossomos, a catepsina B pode influenciar o remodelamento da matriz extracelular por meio de redes de proteases, moldando a migração celular e programas de remodelamento tecidual. A atividade desregulada da catepsina B tem sido associada, em modelos experimentais, à sinalização inflamatória, a defeitos de proteostase relacionados à neurodegeneração e ao remodelamento do microambiente tumoral, tornando **Ctsb** um alvo frequentemente usado para estudar patologias dependentes de proteases. Como parte da família mais ampla das catepsinas, ela se conecta a vias que controlam a biogênese lisossomal, a maturação do fagossomo e mecanismos de morte celular ligados à permeabilização da membrana lisossomal.
cathepsin B O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Ctsb em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Ctsb. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Ctsb. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Ctsb interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.