caspase-14 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-402687

概要

CASP14 はカスパーゼ14をコードしており、アポトーシスよりも主に表皮分化に関与する、カスパーゼファミリーの非典型的メンバーです。ケラチノサイトで高発現し、角層における終末分化プログラムやタンパク質分解処理を支えることで、角化および皮膚バリア形成に寄与します。これらの働きを通じて、カスパーゼ14は水分保持やバリアの健全性の調節に関与し、CASP14 活性を角化や表皮恒常性を制御する経路と結び付けています。CASP14 の発現やプロセシングの変化は、バリア機能障害や炎症性の皮膚表現型と関連づけられており、皮膚疾患の生物学的機序を解明する研究において重要です。

caspase-14 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCASP14遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CASP14内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CASP14のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、caspase-14タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、caspase-14シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CASP14欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• caspase-14の機能に不可欠なCASP14エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CASP14ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• caspase-14 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびcaspase-14 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CASP14遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  caspase-14 HDRプラスミド（h）および caspase-14 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCASP14ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCASP14標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。