caspase-10 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-416840-NIC

CASP10 codifica a caspase-10, uma protease iniciadora cisteína-aspartato recrutada para complexos de sinalização indutores de morte (DISC) a jusante de recetores de apoptose extrínseca, como o FAS e o TNFRSF10 (recetores de TRAIL). Após a ativação, a caspase-10 processa e amplifica a sinalização apoptótica por meio de caspases efetoras a jusante e de comunicação cruzada com vias mitocondriais, moldando decisões de destino celular durante a homeostase imunitária e o stress inflamatório. A atividade de CASP10 interseta-se com contextos de sinalização de NF-κB e de citocinas, nos quais desfechos apoptóticos versus não apoptóticos influenciam a sobrevivência e a ativação de linfócitos. Variações genéticas ou desregulação de CASP10 têm sido associadas a fenótipos de desregulação imunitária e a sensibilidade alterada à apoptose na biologia de tumores hematológicos e sólidos, tornando-o relevante para estudos mecanísticos da sinalização por recetores de morte.

caspase-10 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CASP10 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CASP10. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CASP10. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CASP10 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.