cadherin-24 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-401990

Panoramica

CDH24 codifica la cadherina-24, una proteina di adesione cellula–cellula dipendente dal calcio che contribuisce all’organizzazione dei tessuti epiteliali sostenendo l’integrità delle giunzioni aderenti e la segnalazione dipendente dal contatto. Attraverso interazioni mediate dalle cadherine con le catenine e il citoscheletro di actina, la cadherina-24 influenza processi quali la polarità cellulare, la funzione di barriera e la migrazione cellulare coordinata. Pattern di espressione delle cadherine deregolati possono alterare la coesione intercellulare e le reti di segnalazione associate al rimodellamento epiteliale e a fenotipi legati all’invasione. CDH24 è quindi di interesse per lo studio della regolazione dell’architettura tissutale dipendente dall’adesione e dei cambiamenti nel comportamento cellulare rilevanti per la patologia.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO cadherin-24 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene CDH24 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del CDH24 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto CDH24 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina cadherin-24.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di CDH24 per lo studio della segnalazione di cadherin-24, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni CDH24 critici per la funzione di cadherin-24
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di CDH24 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal cadherin-24 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal cadherin-24 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus CDH24. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal cadherin-24 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR cadherin-24 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia CDH24 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio CDH24 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.