C8β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-408409
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- C8β O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico C8β, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
C8β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-408409 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
C8B codifica a cadeia beta do componente C8 do complemento (C8β), uma subunidade essencial do heterotrímero C8 (C8α, C8β, C8γ) que participa na ativação terminal do complemento. Nas cascatas do complemento clássica, da lectina e alternativa, a C8β ajuda a estabilizar a montagem do complexo de ataque à membrana (MAC; C5b-9) em membranas-alvo, promovendo a formação de poros e a função efetora lítica. Essa atividade contribui para a defesa imunitária inata, a sinalização inflamatória e a comunicação cruzada com processos relacionados à opsonização e à coagulação. Alterações na função terminal do complemento, incluindo a desregulação do MAC, estão associadas a maior suscetibilidade a infeções e a lesão tecidual mediada pelo sistema imunitário, o que torna o C8B um alvo relevante para pesquisas em imunologia e inflamação.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO C8β (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene C8B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do C8B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do C8B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína C8β.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de C8B para a investigação da sinalização de C8β, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) C8B críticos para a função C8β
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos C8B para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo C8β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo C8β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus C8B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo C8β Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR C8β (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia C8B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo C8B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.