C4a Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402428
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- C4a O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico C4a, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
C4a Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402428 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O componente 4A do complemento (C4A) codifica o fragmento C4a gerado durante a ativação proteolítica do complemento C4, uma etapa central nas vias clássica e das lectinas do sistema complemento. A clivagem de C4 favorece a formação da convertase de C3 e promove, a jusante, opsonização, sinalização inflamatória e remoção de complexos imunes. Variações no número de cópias e na expressão de C4A têm sido associadas a desregulação imune e alteração da atividade do complemento, com relevância para fenótipos ligados à autoimunidade e à neuroinflamação. Como indicador de ativação do complemento, o C4a é comumente utilizado para estudar a comunicação cruzada da imunidade inata com respostas adaptativas e mecanismos de lesão tecidual.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO C4a (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene C4A em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do C4A, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do C4A na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína C4a.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de C4A para a investigação da sinalização de C4a, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) C4A críticos para a função C4a
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos C4A para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo C4a Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo C4a Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus C4A. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo C4a Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR C4a (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia C4A para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo C4A definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.