C21orf62 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406451

Übersicht

C21orf62 (chromosome 21 open reading frame 62) kodiert ein bislang nur unzureichend charakterisiertes menschliches Protein, das zunehmend mit grundlegenden zellbiologischen Prozessen in Verbindung gebracht wird, darunter die Regulation nukleärer Vorgänge und zellzyklusassoziierter Gen-Netzwerke. Vorhandene genomische und transkriptomische Datensätze deuten auf eine kontextabhängige Expression sowie eine mögliche Beteiligung an Signalwegen hin, die chromatinassoziierte Ereignisse und zelluläre Stressantworten koordinieren, auch wenn mechanistische Details bislang nur begrenzt bekannt sind. Variationen innerhalb der genomischen Region 21q wurden in Studien zu neuroentwicklungsbezogenen und proliferativen Phänotypen untersucht, wodurch C21orf62 für die Erforschung von Gen-Dosiseffekten und Störungen von Signalwegen relevant ist. Loss-of-function-Analysen können dazu beitragen, seinen Beitrag zu Transkriptionsprogrammen, zellulärer Fitness und der Modulation von Phänotypen in krankheitsrelevanten Modellsystemen zu definieren.

Das C21orf62 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des C21orf62-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des C21orf62-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von C21orf62 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die C21orf62-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von C21orf62-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der C21orf62-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf C21orf62-Exone abzielen, die für die C21orf62-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere C21orf62-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom C21orf62 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom C21orf62 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des C21orf62-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das C21orf62 HDR-Plasmid (h) und C21orf62 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von C21orf62-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten C21orf62-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.