C2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419389
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- C2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico C2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
C2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419389 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O componente 2 do complemento (C2) é um zimogênio central de serinoprotease das vias clássica e das lectinas do sistema complemento em camundongos, clivado por C1s ou MASP2 para gerar C2a e formar a convertase de C3 (C4b2a). Essa etapa impulsiona a amplificação da ativação do complemento, a opsonização, a sinalização inflamatória e a formação subsequente do complexo de ataque à membrana, conectando o reconhecimento imune inato à depuração de complexos imunes e patógenos. A atividade do C2 interage com redes de citocinas e com respostas dependentes de receptores Fc, moldando o recrutamento de leucócitos e a apresentação de antígenos em tecidos imunes. Alterações na função do C2 são amplamente relevantes para estudos de desregulação do complemento associada à autoimunidade, à suscetibilidade a infecções e a mecanismos de lesão tecidual inflamatória.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO C2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene C2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do C2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do C2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína C2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de C2 para a investigação da sinalização de C2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) C2 críticos para a função C2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos C2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo C2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo C2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus C2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo C2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR C2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia C2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo C2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.