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C1qL2慢病毒激活颗粒(m) | sc-432618-LAC | 200 µl | $455.00 |
C1ql2 编码 C1qL2,这是一种分泌型的 C1q/TNF 相关蛋白,在神经系统中富集,参与细胞外信号传导与突触组织。C1qL2 可与神经元表面受体结合,从而影响突触的形成、成熟以及神经回路的维持,而这些过程与活动依赖性的可塑性密切相关。通过这些细胞外信号,C1qL2 与调控细胞—细胞通讯、黏附以及神经元连接性的通路发生交叉。因此,C1qL2 生物学的失调与神经发育和神经退行性机制研究相关,因为突触结构与功能的改变是其中的核心表型。
C1qL2 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 C1ql2 表达。
C1qL2 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在C1ql2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性C1qL2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 C1ql2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。