C12orf34 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-408987

概要

FAM222Aはヒトタンパク質C12orf34をコードしており、細胞恒常性やストレス応答性シグナル伝達との関連が示唆されつつあるものの、機能解析が十分に進んでいない因子です。利用可能なトランスクリプトーム／プロテオームデータセットからは、状況依存的な発現と、炎症関連経路と接点をもつ細胞内輸送やプロテオスタシスのネットワークへの関与の可能性が示されています。FAM222A/C12orf34の発現変動は、神経変性やがん関連データセットを含む疾患関連の分子プロファイルでも報告されており、その制御的役割を引き続き検討する意義が支持されます。機能喪失（loss-of-function）モデルは、C12orf34が細胞生存、シグナルのバランス、組織特異的表現型に影響する経路間クロストークにどのように寄与するかを明らかにするうえで有用です。

C12orf34 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるFAM222A遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、FAM222A内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、FAM222Aのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、C12orf34タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、C12orf34シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、FAM222A欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• C12orf34の機能に不可欠なFAM222Aエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、FAM222Aゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• C12orf34 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびC12orf34 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、FAM222A遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  C12orf34 HDRプラスミド（h）および C12orf34 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFAM222Aホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFAM222A標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。