c-Jun Plasmide Double Nickase (h): sc-400077-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- c-Jun Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il c-Jun Double Nickase Plasmid (h) e il c-Jun Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira JUN. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: p-c-Jun Antibody (KM-1): sc-822
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
c-Jun Plasmide Double Nickase (h) | sc-400077-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
c-Jun Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400077-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
JUN codifica c-Jun, un fattore di trascrizione con motivo a cerniera di leucine che eterodimerizza con le proteine FOS per formare il complesso AP-1 e regolare l’espressione genica in risposta agli stimoli. c-Jun integra segnali provenienti dalle vie MAPK, incluse le cascate JNK ed ERK, per controllare proliferazione, differenziamento, apoptosi e risposte allo stress cellulare. Attraverso programmi trascrizionali dipendenti da AP-1, c-Jun modula la segnalazione infiammatoria, il rimodellamento della matrice extracellulare e la progressione del ciclo cellulare. Un’attività JUN/AP-1 deregolata è frequentemente associata a trasformazione oncogenica, invasione e resistenza alle terapie ed è inoltre implicata in processi infiammatori e fibrotici patologici.
c-Jun Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus JUN nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di JUN. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di JUN. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con JUN interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.