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c-FosCRISPR激活质粒(h) | sc-400009-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
c-FosCRISPR激活质粒(h2) | sc-400009-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
FOS 编码 c-Fos,这是一种即刻早期(immediate-early)转录因子,可对生长因子、细胞因子以及神经元活动等细胞外信号迅速作出反应。作为 AP-1 复合体的核心组分,c-Fos 与 JUN 家族蛋白形成二聚体,在 MAPK/ERK、JNK 和 p38 信号通路下游调控与增殖、分化、凋亡及应激反应相关的基因程序。c-Fos 依赖的转录调控影响炎症与免疫相关通路,并在多种细胞类型中整合由钙信号与激酶驱动的信号传导。FOS 表达或 AP-1 活性失调与肿瘤发生、侵袭和治疗耐受有关,同时也与神经可塑性相关表型及炎症性疾病机制相关。
c-Fos CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性FOS的表达。
c-Fos CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的FOS基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于FOS转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性c-Fos表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的FOS位点,并能够研究内源性位点上依赖于c-Fos的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在FOS表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟c-Fos通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。