C/EBP β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (r): sc-437357
- alvos específicos: rat
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- C/EBP β O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (r) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico C/EBP β, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:C/EBP beta Anticorpo (H-7): sc-7962
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
C/EBP β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (r) | sc-437357 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
A proteína beta de ligação ao potenciador CCAAT (C/EBP β, Cebpb) é um fator de transcrição do tipo zíper de leucina básico que coordena programas gênicos que controlam a diferenciação mieloide, a adipogênese e as respostas de fase aguda dos hepatócitos em células de rato. Ela integra sinais de vias inflamatórias e metabólicas, incluindo a comunicação cruzada entre JAK/STAT induzida por citocinas e NF-κB, para regular redes transcricionais que moldam a ativação imune, as respostas ao estresse e a proliferação celular. A atividade de C/EBP β influencia a polarização de macrófagos e a expressão de genes lipogênicos, vinculando-a a modelos experimentais de inflamação crônica, disfunção metabólica e remodelamento tecidual. Assim, a perturbação da transcrição dependente de Cebpb é amplamente usada para investigar mecanismos subjacentes à fibrose, à resistência à insulina e à dinâmica da sinalização inflamatória.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO C/EBP β (r) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene em linhas celulares rat. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do , juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína C/EBP β.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de para a investigação da sinalização de C/EBP β, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) críticos para a função C/EBP β
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo C/EBP β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (r) e pelo C/EBP β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (r2) têm como alvo locais distintos dentro do locus . Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo C/EBP β Plasmídeo HDR (r) e o Plasmídeo HDR C/EBP β (r2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.