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BTG4慢病毒激活颗粒(h) | sc-408621-LAC | 200 µl | $455.00 |
BTG4(B 细胞易位基因 4)编码 BTG/TOB 家族中的一员,该家族为具有抗增殖作用的蛋白,参与转录后基因调控以及细胞周期进程的控制。BTG4 最为人熟知的功能是通过与 CCR4–NOT 复合体组分相互作用,介导 mRNA 去腺苷化与周转,从而在细胞状态转换过程中对基因表达程序进行时间性调控。由于其对转录本稳定性及与增殖相关通路的影响,BTG4 活性异常与细胞生长和分化失调表型相关,这些表型与肿瘤生物学以及生殖/发育过程密切相关。因此,人 BTG4 是研究 RNA 代谢、细胞周期检查点以及塑造细胞命运的调控网络的一个重要节点。
BTG4 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 BTG4 表达。
BTG4 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在BTG4转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性BTG4表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 BTG4 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。