BTC Plasmide Double Nickase (h): sc-401927-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- BTC Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il BTC Double Nickase Plasmid (h) e il BTC Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira BTC. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: BTC Antibody (E-12): sc-514061
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
BTC Plasmide Double Nickase (h) | sc-401927-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BTC Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401927-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La betacellulina (BTC) è un ligando secreto della famiglia dei recettori del fattore di crescita epidermico che si lega a EGFR ed ERBB4 per stimolare la segnalazione delle tirosin-chinasi recettoriali. L’attivazione delle vie MAPK/ERK e PI3K–AKT indotta da BTC regola la proliferazione, la sopravvivenza e la differenziazione delle cellule epiteliali, con ulteriori ruoli nella riparazione tissutale e nei programmi di sviluppo. Nei contesti pancreatico e gastrointestinale, BTC contribuisce alla comunicazione paracrina influenzando l’omeostasi endocrina ed epiteliale. Una segnalazione BTC–ERBB deregolata è stata implicata in alterazioni del controllo della crescita e nella segnalazione del microambiente infiammatorio, rendendo BTC un nodo rilevante per studi meccanicistici sulla biologia della via EGFR in modelli di malattia.
BTC Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus BTC nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di BTC. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di BTC. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con BTC interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.