Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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BPI Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404909
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BPI O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico BPI, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BPI Anticorpo (H-10): sc-514212
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BPI Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404909 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
A BPI (proteína bactericida/aumentadora da permeabilidade) é um componente dos grânulos dos neutrófilos e um fator da imunidade inata das mucosas, com alta afinidade pelo lipopolissacarídeo (LPS) de bactérias Gram-negativas, no qual neutraliza a atividade de endotoxina e promove a eliminação bacteriana ao comprometer a integridade da membrana externa. Ao ligar-se ao LPS e modular interações com a proteína ligadora de LPS e com componentes de sinalização CD14/TLR4, a BPI pode influenciar respostas inflamatórias a jusante e a produção de citocinas. A expressão e a atividade da BPI são comumente avaliadas no contexto das interações hospedeiro–patógeno, da degranulação de neutrófilos e da defesa de barreiras. A desregulação do processamento do LPS e níveis alterados de BPI têm sido investigados em condições inflamatórias das vias aéreas e gastrointestinais, na biologia da sepse e na suscetibilidade a infecções por Gram-negativas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO BPI (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene BPI em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do BPI, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do BPI na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína BPI.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de BPI para a investigação da sinalização de BPI, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) BPI críticos para a função BPI
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos BPI para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo BPI Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo BPI Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus BPI. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo BPI Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR BPI (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia BPI para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo BPI definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.