BPGM Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405810-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BPGMO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase BPGM (h) e o Plasmídeo Double Nickase BPGM (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para BPGM. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BPGM Anticorpo (C-4): sc-373819
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BPGM Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405810-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BPGM Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405810-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A mutase do bisfosfoglicerato (BPGM) é uma enzima enriquecida na linhagem eritroide que regula o desvio de Rapoport–Luebering ao sintetizar e degradar o 2,3-bisfosfoglicerato (2,3-BPG), um importante efetor alostérico da afinidade da hemoglobina pelo oxigênio. Ao controlar os níveis de 2,3-BPG, a BPGM conecta o fluxo glicolítico ao fornecimento de oxigênio e à homeostase metabólica dos glóbulos vermelhos, influenciando o balanço energético e processos sensíveis ao estado redox em eritrócitos maduros. Alterações na atividade da BPGM perturbam a abundância de 2,3-BPG e podem mudar a dinâmica de dissociação do oxigênio, tornando a BPGM um alvo relevante em estudos de fisiologia eritrocitária e adaptação à hipóxia. A desregulação genética ou metabólica dessa via é investigada no contexto de distúrbios hereditários dos glóbulos vermelhos e de fenótipos associados à anemia, nos quais o transporte de oxigênio e a remodelação glicolítica são afetados.
BPGM O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus BPGM em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de BPGM. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função BPGM. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com BPGM interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.