BNP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421946
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BNP O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico BNP, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BNP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421946 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Nppb codifica o peptídeo natriurético tipo B (BNP), um hormônio cardíaco secretado, cuja expressão é aumentada pelo estiramento do miocárdio e por sinais neuro-hormonais. Após o processamento a partir do proBNP, o BNP sinaliza por meio de receptores de peptídeos natriuréticos para estimular a atividade da guanilil ciclase, elevar os níveis de cGMP e modular o tônus vascular, a natriurese e programas de remodelamento cardíaco. Em camundongos, a expressão de Nppb é amplamente utilizada como um marcador molecular de estresse hemodinâmico e hipertrofia de cardiomiócitos, ligando-se a vias que controlam a fibrose, a renovação da matriz extracelular e a sinalização inflamatória. A desregulação da sinalização BNP/NP é relevante para estudos de sobrecarga de pressão cardíaca, fenótipos de remodelamento associados à insuficiência cardíaca e homeostase cardiorrenal.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO BNP (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Nppb em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Nppb, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Nppb na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína BNP.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Nppb para a investigação da sinalização de BNP, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Nppb críticos para a função BNP
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Nppb para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo BNP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo BNP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Nppb. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo BNP Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR BNP (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Nppb para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Nppb definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.