Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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BMPR-IA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-400581-KO-2
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BMPR-IA O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico BMPR-IA, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BMPR-IA Anticorpo (7K7): sc-134285
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BMPR-IA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) | sc-400581-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
BMPR1A codifica o receptor de proteína morfogenética óssea tipo IA (BMPR-IA), um receptor quinase de serina/treonina que se liga a ligantes de BMP e inicia a sinalização canônica via SMAD1/5/9, bem como vias não canônicas de MAPK. Por meio dessas cascatas, o BMPR-IA regula a especificação do destino celular, a proliferação, a diferenciação e a morfogênese tecidual, com papéis de destaque em programas osteogênicos e na homeostase epitelial. Alterações na sinalização de BMPR1A estão implicadas em anomalias do desenvolvimento e em processos relevantes para o câncer por meio da atividade desregulada da via BMP/TGF-β, incluindo efeitos na dinâmica de células-tronco e no controle do crescimento. Assim, BMPR1A é amplamente estudado em contextos como comprometimento de linhagem, biologia de organoides e crosstalk na transdução de sinais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO BMPR-IA (h2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene BMPR1A em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do BMPR1A, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do BMPR1A na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína BMPR-IA.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de BMPR1A para a investigação da sinalização de BMPR-IA, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) BMPR1A críticos para a função BMPR-IA
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos BMPR1A para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo BMPR-IA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo BMPR-IA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus BMPR1A. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo BMPR-IA Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR BMPR-IA (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia BMPR1A para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo BMPR1A definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.