BMAL2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-435462

概要

Arntl2はBMAL2をコードしており、BMAL2は塩基性ヘリックス・ループ・ヘリックス（bHLH）-PAS型の転写因子で、CLOCK/NPAS2とヘテロ二量体を形成してE-box依存的な遺伝子発現を制御し、マウス組織における概日および代謝の転写プログラムを協調的に調整します。BMAL2は、中核時計回路、リズミックなクロマチン制御、さらに赤色恒常性、脂質・グルコース代謝、細胞周期のタイミングなどの下流経路に対して、時計制御遺伝子の転写制御を介して影響を及ぼします。文献上、ARNTL2/BMAL2に関連するネットワークの機能異常は、炎症シグナル伝達の変化、ストレス応答、細胞移動および分化の変化と関連づけられており、概日リズム破綻の機序研究において重要です。in vivoおよび細胞モデルは、BMAL2が組織特異的な時計出力や環境刺激への適応に関与することを示しており、臨床的転帰を示唆することなく、神経生物学、代謝、腫瘍関連の転写状態に関する研究での利用を支持します。

BMAL2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるArntl2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Arntl2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Arntl2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、BMAL2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、BMAL2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Arntl2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• BMAL2の機能に不可欠なArntl2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Arntl2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• BMAL2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびBMAL2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Arntl2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  BMAL2 HDRプラスミド（m）および BMAL2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはArntl2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のArntl2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。