Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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BLM hydrolase Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404411
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BLM hydrolase O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico BLM hydrolase, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BLM hydrolase Anticorpo (F-9): sc-166777
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BLM hydrolase Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404411 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O BLMH humano codifica a hidrolase de bleomicina, uma aminopeptidase citosólica de cisteína envolvida no processamento proteolítico de peptídeos intracelulares e na manutenção do controle de qualidade de proteínas. O BLMH participa da reciclagem de aminoácidos e tem sido associado a respostas ao estresse celular por meio de efeitos sobre a renovação de peptídeos e as redes de proteostase. Alterações na atividade do BLMH têm sido estudadas em contextos de metabolismo de fármacos e suscetibilidade à citotoxicidade induzida por bleomicina, e também foram exploradas por potenciais conexões com fenótipos neurodegenerativos e inflamatórios nos quais vias de depuração de peptídeos estão perturbadas. Como uma enzima amplamente expressa, o BLMH oferece um ponto útil para investigar como a homeostase dependente de peptidases se cruza com o estresse oxidativo e a sinalização de resposta a danos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO BLM hydrolase (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene BLMH em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do BLMH, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do BLMH na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína BLM hydrolase.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de BLMH para a investigação da sinalização de BLM hydrolase, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) BLMH críticos para a função BLM hydrolase
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos BLMH para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo BLM hydrolase Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo BLM hydrolase Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus BLMH. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo BLM hydrolase Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR BLM hydrolase (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia BLMH para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo BLMH definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.