BLCAM Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401451-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD22O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CD22 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CD22 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CD22. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD22 Anticorpo (D-5): sc-271579
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BLCAM Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401451-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD22 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401451-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A CD22 humana, também conhecida como BLCAM, é uma lectina do tipo imunoglobulina de ligação ao ácido siálico restrita a células B, que atua como um correceptor inibitório do recetor de antigénio das células B (BCR). Após o envolvimento do BCR, a CD22 é fosforilada e recruta a fosfatase SHP-1, atenuando a sinalização de quinases a jusante e modulando o fluxo de cálcio, a ativação de MAPK e vias ligadas à PI3K que moldam a ativação e a tolerância das células B. Pelo seu papel no controlo dos limiares de sinalização e na promoção da homeostase imunitária, a CD22 contribui para a regulação da responsividade a antigénios, de sinais de sobrevivência e para a manutenção da autotolerância periférica das células B. A desregulação da sinalização ou da expressão de CD22 tem sido associada a estados aberrantes de ativação de células B relevantes para a autoimunidade e para a biologia de neoplasias derivadas de células B, sustentando a sua utilização em estudos mecanísticos do controlo da via do BCR.
CD22 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CD22 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CD22. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CD22. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CD22 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.