BIGM103 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-426620

概要

Slc39a8 は、主に二価陽イオンの細胞内取り込みを担う ZIP ファミリーの金属イオントランスポーター（BIGM103）をコードしており、特にマンガン（Mn）恒常性の維持に強く関与します。細胞内 Mn の利用可能量を制御することで、SLC39A8 は Mn 依存性酵素の活性に影響を与え、糖鎖修飾、ミトコンドリア代謝、レドックスバランスなどの過程を支えます。SLC39A8 機能の変化は、金属代謝の破綻およびそれに続く炎症シグナルや代謝経路への影響と関連づけられており、栄養–遺伝子相互作用やストレス応答性の細胞表現型を研究するうえで重要です。マウス系では、Slc39a8 はトランスポーター生物学、自然免疫応答、代謝関連形質の文脈でしばしば研究されています。

BIGM103 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSlc39a8遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Slc39a8内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Slc39a8のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、BIGM103タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、BIGM103シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Slc39a8欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• BIGM103の機能に不可欠なSlc39a8エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Slc39a8ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• BIGM103 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびBIGM103 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Slc39a8遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  BIGM103 HDRプラスミド（m）および BIGM103 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSlc39a8ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSlc39a8標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。