Bex2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-404711

概要

BEX2（brain expressed X-linked 2）はBex2をコードしており、Bex2は小型で本質的に無秩序（intrinsically disordered）なタンパク質です。神経組織をはじめとするさまざまな組織で高発現し、状況依存的に転写プログラムやタンパク質間相互作用ネットワークを調節するモジュレーターとして機能します。これまでに報告されている機能から、Bex2は神経栄養因子シグナルとストレス応答経路の接点に位置し、MAPK/ERKを含む関連する生存シグナルに影響し得る相互作用を介して、神経細胞分化、細胞周期制御、アポトーシスに関与することが示されています。BEX2の発現異常は、神経発生・発達過程や腫瘍生物学など、複数の疾患関連コンテキストで報告されており、増殖、系譜プログラム、治療応答表現型の変化との関連が示唆されています。これらの特徴により、BEX2はヒト細胞モデルにおけるシグナルから転写への結合や細胞運命決定を解析するうえで有用なノードとなります。

Bex2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるBEX2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、BEX2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、BEX2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Bex2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Bex2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、BEX2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Bex2の機能に不可欠なBEX2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、BEX2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Bex2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびBex2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、BEX2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Bex2 HDRプラスミド（h）および Bex2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはBEX2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のBEX2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。