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Bek/FGFR2双切口酶质粒(h) | sc-400249-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Bek/FGFR2双切口酶质粒(h2) | sc-400249-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FGFR2(Bek)编码一种受体酪氨酸激酶,可结合多种成纤维细胞生长因子(FGF)。它通过协调细胞增殖、生存、迁移与分化来调控胚胎发育以及成体组织稳态。配体结合会驱动受体二聚化并发生自磷酸化,从而激活经典的 MAPK/ERK、PI3K–AKT、PLCγ–PKC 和 STAT 等信号程序,并塑造其与整合素及细胞外基质线索之间的串话。FGFR2 信号受可变剪接与反馈调控因子的严格控制,因此是上皮—间质通讯与形态发生模式建立中的关键节点。FGFR2 活性失调或异构体使用改变与颅颌面发育障碍相关,并在多种肿瘤背景中反复与致癌性信号表型相关联。
Bek/FGFR2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 FGFR2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对FGFR2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏FGFR2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了FGFR2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。