Bcl-6 Plasmide Double Nickase (h): sc-400265-NIC

Il gene umano **BCL6** codifica **Bcl-6**, un repressore trascrizionale a dita di zinco **BTB/POZ** che coordina programmi di espressione genica responsabili della formazione, proliferazione e differenziazione delle cellule B del centro germinativo. Bcl-6 modula la cromatina e gli esiti trascrizionali reclutando complessi corepressori, limitando così le risposte al danno del DNA, l'apoptosi e la segnalazione infiammatoria, per mantenere checkpoint di sviluppo rigidamente regolati. Dal punto di vista funzionale, interagisce con vie come **NF-κB**, le risposte allo stress dipendenti da **p53** e la segnalazione **JAK/STAT** indotta da citochine, influenzando le decisioni di destino delle cellule immunitarie. Un'attività di BCL6 deregolata e reti alterate di repressione trascrizionale sono fortemente associate alla biologia delle neoplasie a cellule B e alla disregolazione immunitaria, rendendolo un bersaglio frequente negli studi meccanicistici sulla trasformazione linfoide e sul controllo trascrizionale.

Bcl-6 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus BCL6 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di BCL6. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di BCL6. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con BCL6 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.