BACE2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403147

概要

BACE2（β部位APP切断酵素2）は、ペプシンファミリーに属するI型膜貫通型のアスパラギン酸プロテアーゼで、分泌系およびエンドサイトーシス系の区画に局在し、膜タンパク質の制御されたプロテオリシスに関与します。アミロイド前駆体タンパク質（APP）のプロセシングに関連する経路や、ゴルジ体—エンドソーム—リソソーム系におけるより広範なプロテオスタシスに関与し、基質タンパク質の輸送や分解・ターンオーバーに影響を与えます。BACE2活性は、神経生物学や代謝調節（膵島機能や炎症性シグナル伝達ネットワークを含む）の文脈で研究されています。BACE2の発現やプロテアーゼ活性の破綻は、神経変性やがん関連の細胞挙動における疾患関連表現型と関連づけられており、機能ゲノミクスにおけるメカニスティックな標的としての利用を支持しています。

BACE2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるBACE2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、BACE2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、BACE2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、BACE2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、BACE2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、BACE2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• BACE2の機能に不可欠なBACE2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、BACE2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• BACE2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびBACE2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、BACE2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  BACE2 HDRプラスミド（h）および BACE2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはBACE2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のBACE2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。