BABAM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-409906

概要

BABAM1（BABAM1）は、DNA二本鎖切断（DSB）部位におけるユビキチン化クロマチンを認識し、DNA損傷応答の調整を担うBRCA1-A複合体の中核構成因子です。BABAM1はBRCA1および関連因子との相互作用を通じて、損傷シグナル伝達を調節し、相同組換え（HR）の制御に関わる過程を含む修復経路の選択に影響を与えることで、ゲノム安定性の維持に寄与します。その活性は細胞周期チェックポイント制御や複製ストレス応答とも連動しており、クロマチン依存的な修復協調の研究において重要です。BRCA1-A複合体機能の破綻は、DNA修復能の変化やゲノム不安定性といった表現型と関連づけられており、複数のがんの文脈で観察されています。

BABAM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるBABAM1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、BABAM1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、BABAM1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、BABAM1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、BABAM1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、BABAM1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• BABAM1の機能に不可欠なBABAM1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、BABAM1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• BABAM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびBABAM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、BABAM1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  BABAM1 HDRプラスミド（h）および BABAM1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはBABAM1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のBABAM1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。