ATP6AP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404162-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ATP6AP1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ATP6AP1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ATP6AP1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ATP6AP1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ATP6AP1 Anticorpo (E-10): sc-515607
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ATP6AP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404162-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ATP6AP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404162-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATP6AP1 codifica um componente acessório do maquinário da H+-ATPase vacuolar (V-ATPase) que dá suporte à acidificação de organelas em todo o sistema endolisossomal. Ao modular o pH luminal em compartimentos como lisossomos e o complexo de Golgi, a ATP6AP1 influencia o tráfego de proteínas, a reciclagem de receptores e a degradação de macromoléculas dependente de lisossomos, moldando assim a proteostase e a sinalização celulares. O funcionamento adequado da V-ATPase se relaciona com as vias de autofagia–lisossomo e com processos secretórios dependentes de glicosilação, que são críticos para manter a homeostase em condições metabólicas e de estresse. A desregulação da acidificação e do tráfego associados à ATP6AP1 tem sido ligada a distúrbios que afetam o metabolismo celular, o transporte de membrana e a fisiologia de órgãos e sistemas, tornando-a um alvo relevante para estudos mecanísticos da função do endomembrana.
ATP6AP1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ATP6AP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ATP6AP1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ATP6AP1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ATP6AP1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.