ATP5JCRISPR激活质粒(m): sc-419251-ACT
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- ATP5J CRISPER激活质粒（m）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，目的在于特定上调基因表达
- ATP5J CRISPR 激活质粒 (m)包含三种质量比为1:1:1的质粒：一种质粒编码与转录激活结构域VP64融合的去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，和杀稻瘟素抗性基因；一种质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白，和潮霉素抗性基因；一种质粒编码与两个MS2 RNA适体融合的目标特异的20 nt向导RNA，和嘌呤霉素抗性基因。
- 形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因提供转录因子的招募
- 由 ATP5J CRISPR 激活质粒 (m) 和 ATP5J CRISPR 激活质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别针对 Atp5j 转录起始位点上游的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
ATP5JCRISPR激活质粒(m) | sc-419251-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
ATP5JCRISPR激活质粒(m2) | sc-419251-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
Atp5j 编码 ATP5J（亦称 F6），它是线粒体 F1Fo ATP 合酶（复合体 V）的一个小型辅助亚基，有助于复合体的组装，并在氧化磷酸化过程中促进质子通量与 ATP 生成之间的高效偶联。通过调节线粒体生物能量学，ATP5J 有助于维持细胞 ATP/ADP 平衡、线粒体膜电位，并在能量需求变化时保持代谢灵活性。ATP 合酶功能及其下游呼吸链活性的扰动与线粒体功能障碍表型相关，这些表型会影响高耗能组织，并与氧化应激及凋亡相关过程相互交织。在小鼠模型中，改变线粒体 ATP 产量常被用于在线粒体通路层面研究与神经肌肉、心脏及代谢性疾病生物学相关的机制。
ATP5J CRISPR激活质粒（m）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性Atp5j的表达。
ATP5J CRISPR激活质粒（m）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的Atp5j基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于Atp5j转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性ATP5J表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的Atp5j位点，并能够研究内源性位点上依赖于ATP5J的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在Atp5j表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟ATP5J通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。