ATP11C CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-435843

概要

Atp11c はATP11Cをコードしており、ATP11CはP4-ATPase型のリン脂質フリッパーゼとして、ホスファチジルセリンなどのアミノリン脂質を細胞膜の外葉から内葉へ移送することで、形質膜の脂質非対称性を維持します。この活性は、小胞輸送、エンドサイトーシス、膜リモデリングといった過程を支え、受容体シグナル伝達や細胞生存プログラムに影響を与えます。マウスでは、ATP11Cの機能が造血系および免疫系の恒常性と関連しており、その異常はB細胞分化や赤血球系の生物学に影響を及ぼすことから、免疫不全様表現型や貧血関連機構の研究において重要です。さらに、ATP11Cが制御する膜脂質分布の変化は、細胞表面でのホスファチジルセリン露出を介して、アポトーシス細胞のクリアランスや炎症性シグナル伝達も調節し得ます。

ATP11C CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるAtp11c遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Atp11c内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Atp11cのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ATP11Cタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ATP11Cシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Atp11c欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ATP11Cの機能に不可欠なAtp11cエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Atp11cゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ATP11C CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびATP11C CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Atp11c遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ATP11C HDRプラスミド（m）および ATP11C HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはAtp11cホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のAtp11c標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。