Atg2B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-429358
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Atg2B O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Atg2B, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Atg2B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-429358 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Atg2b codifica a proteína relacionada à autofagia Atg2B, um fator conservado necessário para a biogênese e a maturação de autofagossomos. A Atg2B atua no manejo de lipídios em sítios de contato entre membranas, sustentando a expansão do fagóforo e um fluxo autofágico eficiente — processos que integram a detecção de nutrientes e o controle de qualidade de organelas. A disrupção de vias de autofagia que envolvem a Atg2B pode comprometer a proteostase, a homeostase mitocondrial e a sinalização imune inata, conectando esse gene a mecanismos relevantes para neurodegeneração, biologia do câncer e fenótipos inflamatórios em modelos experimentais. Em sistemas murinos, Atg2b é, portanto, amplamente estudado por seu papel na adaptação ao estresse celular e na remoção de macromoléculas danificadas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Atg2B (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Atg2b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Atg2b, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Atg2b na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Atg2B.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Atg2b para a investigação da sinalização de Atg2B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Atg2b críticos para a função Atg2B
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Atg2b para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Atg2B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Atg2B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Atg2b. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Atg2B Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Atg2B (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Atg2b para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Atg2b definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.