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ATF-6α慢病毒激活颗粒(m) | sc-432646-LAC | 200 µl | $455.00 |
转录激活因子6(ATF-6α)是一种定位于内质网(ER)的跨膜传感器。在内质网应激期间,它会被切割并转位进入细胞核,在那里启动有助于恢复蛋白质稳态(proteostasis)的转录程序。作为未折叠蛋白反应(UPR)的核心分支之一,ATF-6α协调内质网分子伴侣的表达、内质网相关降解(ERAD)组分以及分泌通路的重塑,并与PERK和IRE1信号通路整合,共同调控细胞存活与适应。在小鼠体系中,对Atf6的调控常用于研究分泌细胞功能、氧化与代谢应激的应对能力,以及炎症信号的串扰。ATF6信号失调与神经退行性变、糖尿病相关应激以及心脏重塑模型中观察到的蛋白质稳态失衡有关,因此是进行机制性通路分析的一个重要节点。
ATF-6α 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Atf6 表达。
ATF-6α 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Atf6转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性ATF-6α表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Atf6 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。