Ataxin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-422807

概要

Atxn2は、RNA結合タンパク質であるAtaxin-2をコードしており、ポリリボソームやリボ核タンパク質顆粒と結合してmRNAの安定性および翻訳に影響を与える、転写後遺伝子発現の保存的な制御因子である。マウス細胞では、Ataxin-2はストレス顆粒およびP-bodyの動態に関与し、栄養シグナル伝達や細胞ストレス応答をRNA代謝と結び付けている。さらに、プロテオスタシスと神経細胞の恒常性を制御する経路と連携し、ATXN2の発現量の変化は神経変性に関連する過程と結び付けられてきた。これらの特性により、Atxn2は、実験モデルにおけるRNA制御ネットワーク、ストレス適応プログラム、ならびに神経関連表現型を解析するための有用な標的となる。

Ataxin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるAtxn2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Atxn2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Atxn2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Ataxin-2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Ataxin-2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Atxn2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Ataxin-2の機能に不可欠なAtxn2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Atxn2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Ataxin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびAtaxin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Atxn2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Ataxin-2 HDRプラスミド（m）および Ataxin-2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはAtxn2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のAtxn2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。