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Asporin慢病毒激活颗粒(m) | sc-426152-LAC | 200 µl | $455.00 |
Aspn 编码 asporin(天冬氨酸蛋白聚糖),这是一种分泌型的小亮氨酸富集蛋白聚糖,富集于细胞外基质(ECM)中,可调控胶原原纤维形成以及组织的生物力学特性。Asporin 能与并调节多种生长因子信号(包括 TGF-β 家族通路),从而影响软骨细胞分化、成纤维细胞激活和基质重塑。在小鼠模型中,Aspn 表达的改变常用于研究软骨稳态、骨骼发育及结缔组织维持。与 asporin 生物学相关的 ECM 结构失衡和异常 TGF-β 信号传导,也与退行性关节改变、纤维化相关重塑以及肿瘤—基质相互作用的机制研究密切相关。
Asporin 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Aspn 表达。
Asporin 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Aspn转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Asporin表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Aspn 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。