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ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1CRISPR激活质粒(h) | sc-400429-ACT | 20 µg | $397.00 |
ASGR1 编码去唾液酸糖蛋白受体 1(asialoglycoprotein receptor 1,ASGPR1)。ASGPR1 是一种在肝细胞中高表达的 C 型凝集素,可在肝窦侧质膜上形成具有功能的受体复合物,用于识别去唾液酸化糖蛋白末端的半乳糖或 N-乙酰半乳糖胺。该受体介导网格蛋白依赖性的内吞作用及溶酶体转运,从而维持血清糖蛋白稳态,并促进肝脏对循环糖蛋白及糖链修饰颗粒的清除。ASGPR1 的活性将糖链识别与受体回收和细胞内分选通路相连接,并与内吞机制及肝脏代谢过程相整合。ASGR1 的表达或功能改变与脂蛋白处理的变化及心代谢表型相关,因此在研究肝脏特异性摄取、血浆蛋白周转以及糖基化-免疫相互作用方面具有重要意义。
ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性ASGR1的表达。
ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的ASGR1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于ASGR1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的ASGR1位点,并能够研究内源性位点上依赖于ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在ASGR1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。