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ASCL1慢病毒激活颗粒(h) | sc-402039-LAC | 200 µl | $455.00 |
ASCL1(achaete-scute 家族 bHLH 转录因子 1)是一种促神经发生的碱性螺旋-环-螺旋(bHLH)调控因子,通过结合 E-box 基序来控制人类神经发生过程中的神经元谱系承诺、细胞周期退出以及分化程序。它在包含 NOTCH 信号通路、REST 介导的转录抑制以及染色质重塑的转录网络中发挥作用,从而协调神经内分泌与神经元基因表达状态。ASCL1 活性失调与多种肿瘤背景中观察到的异常谱系可塑性和神经内分泌分化表型相关,因此是研究由转录因子驱动的细胞状态转换的关键节点。因而,ASCL1 被广泛用于建立神经元重编程模型、研究神经发育通路,以及阐明将分化信号与增殖控制相耦联的机制。
ASCL1 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 ASCL1 表达。
ASCL1 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在ASCL1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性ASCL1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 ASCL1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。