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ASCL1双切口酶质粒(m) | sc-421562-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ASCL1双切口酶质粒(m2) | sc-421562-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Achaete-scute 家族 bHLH 转录因子 1(ASCL1;Ascl1)是一种促神经(proneural)调控因子,在小鼠神经系统发育过程中推动神经元谱系的命运承诺与分化。ASCL1 通过结合 E-box 基序来协调转录程序,将细胞周期退出与神经发生相耦联,并与 Notch 信号通路、染色质重塑以及塑造神经前体细胞命运决策的 bHLH 调控网络相互作用。ASCL1 活性的改变常用于建立模型,以研究与发育神经生物学相关的分化失调状态,以及疾病相关细胞状态转换中出现的、依赖具体情境的神经内分泌样转录程序。
ASCL1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Ascl1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Ascl1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Ascl1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Ascl1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。