ARHGAP19 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406142-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ARHGAP19O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ARHGAP19 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ARHGAP19 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ARHGAP19. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ARHGAP19 Anticorpo (B-11): sc-398428
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ARHGAP19 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-406142-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ARHGAP19 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-406142-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ARHGAP19 codifica uma proteína ativadora de GTPase da família Rho (RhoGAP) que reduz a sinalização da família RHO ao acelerar a hidrólise de GTP, ajustando assim a organização do citoesqueleto de actina e os efeitos downstream sobre a forma celular, a adesão e a motilidade. Por meio da modulação de vias dependentes de Rho, a ARHGAP19 contribui para o controlo espaciotemporal da dinâmica da membrana e da remodelação do citoesqueleto durante processos como a migração e o tráfego de células imunitárias. A regulação alterada de Rho GTPases está amplamente associada a proliferação desregulada, invasão e sinalização inflamatória, tornando a ARHGAP19 um nó útil para o estudo da transdução de sinal acoplada ao citoesqueleto. A expressão e a perturbação funcional de ARHGAP19 têm sido examinadas em contextos relevantes para a biologia hematopoiética e imunológica, nos quais a sinalização de Rho influencia a diferenciação e as respostas efetoras.
ARHGAP19 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ARHGAP19 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ARHGAP19. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ARHGAP19. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ARHGAP19 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.