Apelin Plasmide Double Nickase (m): sc-424407-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Apelin Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Apelin Double Nickase Plasmid (m) e il Apelin Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Apln. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Apelin Plasmide Double Nickase (m) | sc-424407-NIC | 20 µg | $410.00 |
Il gene Apln del topo codifica l’apelina, un ligando peptidico secreto del recettore accoppiato a proteine G APJ/APLNR, che regola l’omeostasi cardiovascolare, l’angiogenesi, l’equilibrio dei fluidi e la segnalazione metabolica. L’interazione apelina–APJ attiva le vie PI3K–AKT, ERK/MAPK e quelle collegate ad AMPK, influenzando la migrazione delle cellule endoteliali, la produzione di ossido nitrico e il rimodellamento vascolare, e si interseca con programmi guidati dall’ipossia, come le risposte dipendenti da HIF. Nel sistema nervoso centrale e nei tessuti periferici, l’apelina contribuisce alla regolazione neuroendocrina e al bilancio energetico, con effetti dipendenti dal contesto su processi associati a infiammazione e fibrosi. Un’alterazione della segnalazione Apln/apelina è spesso studiata in modelli di insufficienza cardiaca, ipertensione, ischemia, disfunzione metabolica e angiogenesi associata ai tumori, per comprendere i determinanti a livello di via di segnalazione dei fenotipi di malattia.
Apelin Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Apln nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Apln. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Apln. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Apln interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.