ANP32A Lentiviral Activation Particles (m2): sc-419111-LAC-2

マウスのAnp32aは、ヒストンシャペロンとして働きクロマチン構造の編成を調節する、保存性の高い酸性核内リン酸化タンパク質ANP32Aをコードしており、転写制御や細胞周期の進行に影響を及ぼす。ANP32AはmRNAプロセシングやプロテインホスファターゼ2A（PP2A）関連シグナル伝達などの核内過程に関与し、調節タンパク質複合体との相互作用を介してアポトーシスや細胞ストレス応答の制御にも関わることが示唆されている。ANP32A活性の変化は神経変性、腫瘍生物学、炎症性シグナル伝達に関連する表現型と結び付けられており、マウスモデルにおける遺伝子型—表現型関係の研究に有用な座位となる。Anp32aの遺伝子編集は、初代細胞およびin vivo系において、エピジェネティック制御、核内シグナルネットワーク、疾患関連経路の機序解明を進めるうえで有効である。

ANP32A レンチウイルス活性化粒子（m2）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なAnp32aの発現上昇を可能にします。

ANP32A レンチウイルス活性化粒子（m2）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、Anp32a転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性ANP32Aの発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のAnp32aゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。