Annexin VII Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402823-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Annexin VIIO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Annexin VII (h) e o Plasmídeo Double Nickase Annexin VII (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ANXA7. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Annexin VII Anticorpo (A-1): sc-17815
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Annexin VII Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402823-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Annexin VII Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402823-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ANXA7 codifica a anexina VII, uma proteína de ligação a fosfolipídios dependente de Ca²⁺ que se associa às membranas celulares para coordenar o tráfego de membranas, a exocitose e o reparo de membranas. A anexina VII contribui para a dinâmica de fusão de vesículas regulada por Ca²⁺ e tem sido relacionada à remodelação do citoesqueleto e a eventos de transdução de sinal que dependem da organização de microdomínios lipídicos. Por meio de suas funções em endomembranas e na membrana plasmática, a ANXA7 pode influenciar respostas ao estresse e a homeostase celular. Alterações na expressão ou na regulação de ANXA7 foram relatadas em contextos que incluem a biologia do câncer e pesquisas sobre doenças neurológicas, sustentando a investigação de sua função em proliferação, migração e vias de secreção dependentes de Ca²⁺.
Annexin VII O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ANXA7 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ANXA7. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ANXA7. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ANXA7 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.